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微生物技术在乳品安全检查中的应用

摘要:本文主要介绍了食源性病原体免疫学,核酸探针技术,PCR技术,生物芯片技术和生物传感测量技术在乳品安全检查中的一些应用。

关键字:现代乳制品微生物;检测技术;食品安全;应用

近年来,乳制品的安全性已逐渐深入人心。微生物食物中毒的报告数量和中毒人数逐年下降。随着人们生活水平的提高和安全意识的提高,提出了更高的乳品安全标准。食品安全的要求已成为全球关注的焦点,现代乳品微生物检测技术的发展及其在乳品安全检测中的应用也引起了越来越多的关注。

1.现代乳制品微生物测量技术研究的主要内容

1. 1基因探针技术及其应用

基因探针是指一小段已知序列的寡核苷酸,并用核素,生物素,地高辛等进行可测量的标记。原理是通过分子杂交与靶基因结合以产生杂交信号并找到靶基因。 。探针标签分为两种类型:核素和非同位素。核酸探针可以快速检查李斯特菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,志贺氏菌等。

[1]例如,检查单核细胞增生李斯特氏菌,可以直接进行测量,而不受待测样品含量的影响。该技术更复杂,更昂贵,许多只能在实验室中进行。

1991年,周志江等[2]使用生物素标记的编码大肠杆菌耐热毒素(ST)的DNA片段作为遗传探针,以检测受污染的乳制品中产生ST的大肠杆菌。 1993年3月,陈谦[3]等。用rp-z基因探针通过血清学筛查从乳制品中分离出的78株ESIEC弧菌菌株的HPI毒力岛基因,检测出7株。可以鉴定为ESIEC大肠杆菌。该方法特异性强,灵敏,无放射性,不需要复杂的细菌扩增和纯化,节省了时间,减少了毒力损失的机会,提高了测量的准确性。

1. 2聚合酶链反应(PCR)技术及其应用

PCR技术是指用于在体外酶促合成特定DNA片段的技术。它从低温变性-低温退火(复性)-合适的温度延伸产生一个循环,以快速扩增靶DNA。 PCR技术可以在几小时到十万到一百万次的时间内扩增目标基因或DNA片段,可以用肉眼直接观察到。测量时间大大缩短,可以在几个小时内完成

是的。具有特异性强,灵敏度高,操作简单生物技术 食品安全,节省时间,易于自动化的特点。在乳品致病菌的检验中具有广阔的应用前景。它可以检测乳制品中的沙门氏菌,大肠埃希菌,肉毒梭菌,金黄色葡萄球菌,单核细胞增生李斯特菌等。 [2]

1. 3 PCR检测方法的问题与展望

使用PCR检测乳制品中的病原微生物和转基因成分的方法似乎具有特异性强,灵敏度高,简便和快速的优点,但也存在许多问题。首先是假阳性结果的形成。 PCR是非常敏感的反应。一旦极少量的外源DNA污染,就会出现假阴性结果,并且样品之间的交叉污染或时间的延长也将导致PCR产物中假阴性的形成。因此,有必要在PCR检查过程中严格操作,并准备好阳性对照以确保测量结果的准确性。第二个是质粒问题。目前,PCR质粒的合成是该技术普及的最大障碍,需要进一步的改进才能有望成为乳制品微生物常规检测技术之一。另外,对各种实验条件的控制不当或对靶序列的选择不当可能会导致产物突变或降低其敏感性和特异性。因此,稳定性也是PCR技术中必须改善的问题之一。前述的实时荧光定量PCR方法似乎克服了假阴性和定量准确性低的难题,但是由于荧光定量PCR仪器的高价格,目前暂时不能广泛推广。因此,如何结合其他技术使PCR成为一种稳定,灵敏,易操作,低成本的技术,将是今后研究的主要内容之一。

1. 4生物芯片技术及其应用

也可以称为DNA微阵列(DNAmicroarray)。生物芯片技术是指由数以千万计的核苷酸分子(CDNA分子,寡核苷酸分子等)根据预定位置固定在液体载体上的面积太小的区域组成的微阵列阵列。首先,标记样品中的核苷酸片段。在某些条件下,来自样品的互补核苷酸片段可以与载体上的核酸分子杂交,并且可以在专用芯片读取器上测量杂交信号。基因芯片技术实际上是一种高度集成的反向暗点杂交技术,解决了传统核苷酸印迹杂交技术自动化程度低,操作复杂,检测目标分子数量少,成本高,效率低,结果客观性差等问题。 。但是,由于芯片制造的复杂性以及样品制备和标记的复杂性,该技术尚未广泛用于食品微生物检测中。因此,在病原微生物检测中具有良好的发展前景。

该生物芯片可以一次性进行多种潜在病原菌的检测,并且可以对乳制品中的病原菌进行高通量检查。所有测量结果都可以在一个实验中获得,并且操作简单,快速,特定且灵敏,所有测量都可以在几个小时内完成。但是由于芯片的复杂性,它们大多处于实验阶段,尚未得到广泛应用。

1. 5生物传感测量技术及其应用

有许多类型的微生物会污染乳制品生物技术 食品安全,主要包括真菌,真菌和病毒,其中最常见的是真菌。污染乳制品的微生物分为腐败菌和致病菌。腐败细菌本身不会引起疾病。它们主要通过分解和破坏乳制品成分而产生有毒有害物质,对人体造成伤害。生物传感测量技术可以快速检查微生物,例如污染乳制品的病原体;生物毒素和其他毒素的测量。尤其是,黄曲霉毒素B1(AFB 1)是迄今为止检测到的最强细菌毒素。用光纤免疫传感器测定玉米和玉米粉可以产生低至0.05μg/ L的AFB1。用于乳制品安全检查。

2.摘要

食品安全检查的一个非常重要的部分是及时准确地测量乳制品中的病原微生物。传统的微生物测量方法似乎是有效且高度专一的,但存在诸如检查成本高,速度慢,效率低等问题,这些问题难以满足现代社会中快速检查的要求,并且因为传统的微生物测量方法基本上是需要人工病原体。耕种,某些生长缓慢或新的病原体无法通过传统方法进行测量。另外,近年来出现的转基因食品中的转基因成分的安全性检查无法通过传统的测量方法进行监控。遗传探针技术,PCR技术,免疫学技术等作为现代生物技术方法,被应用于乳制品中的乳制品微生物或转基因成分的检测,克服了传统乳品安全检测方法的弊端和不足。具有很高的灵敏度和操作性。它具有简单,检测周期短,检测成本低的优点。 DNA探针杂交技术与PCR技术结合用于乳制品微生物的检测将是今后乳制品微生物检测技术的重要研究方向。如果可以克服由于两者容易污染而导致的假阳性结果的缺乏,那么相信大规模的推广和应用指日可待。尽管目前生物芯片技术似乎并未真正用于乳品安全检查,但由于它结合了多种学科的高科技,其优势将变得越来越重要,并且有望成为未来乳品安全检查的支柱。

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